Антинуклеарный фактор (анф) и антитела (ана): понятие, исследование и показания к нему, причины обнаружения
Содержание:
- Стоимость
- Иммуногистохимические особенности, характерные для инвазивной крибриормной карциномы груди
- Расшифровка результатов анализа (для специалистов!*)
- Изучение полученных результатов
- Антиядерные антитела, скрининг Antibodies against nuclear antigens (ANAs, EIA)
- АНА ИЛИ АНТИЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА
- Ревматоидный фактор
- Показания к назначению
- Повышение показателя
- Категории
- Механизм образования
- Показания к проведению исследования
- Нормальные значения АНА
- Что показывает
- Иммуноблот на антиядерные антитела
- Подготовка к анализу и методика проведения исследования
- Диагностика иммунологического бесплодия
Стоимость
Сдать анализ АНФ можно в независимой лаборатории, частной клинике или государственном медицинском учреждении
Важно знать о том, что не во всех бюджетных поликлиниках подобная услуга предоставляется. Относительно ее наличия необходимо уточнять в регистратуре
Исследование является платным даже в государственных медицинских учреждениях. Стоимость анализа напрямую зависит от ценовой политики клиники, складывающейся из множества факторов. Минимальная цена составляет 1000 рублей, максимальная не превышает 1700 рублей. Кроме того, необходимо дополнительно оплатить забор крови. Стоимость данной услуги, как правило, не превышает 200 рублей.
Иммуногистохимические особенности, характерные для инвазивной крибриормной карциномы груди
Резекционные образцы фиксируют в 10% нейтральном формалине с последующей обычной дегидратацией и встраиванием парафина. Толщина каждого образца составляет 4 мкм. Выполняется окрашивание гематоксилином и эозином (H&E), затем проводится иммуногистохимия. Используемые антитела включают ER, PR, HER-2, Ki-67, Кальпонин, p63, CK5/6, CD10, E-кадгерин, p120, p53, CD56, CgA, Syn.
Инвазивная крибриформная карцинома молочной железы имеет тенденцию быть положительной по рецепторам эстрогена почти в 100% случаев, а рецепторам прогестерона почти в 70%. Заметной разницы в статусе рецепторов гормонов при чистом и смешанном типах решетчатой карциномы молочной железы не установлено. Рецептор эстрогена (ER) и рецептор прогестерона (PR) являются важными маркерами для направления терапии и определения прогноза.
Амплификация рецептора 2 эпидермального фактора роста человека (HER-2) выявляется крайне редко. Статус Her2neu можно определить с помощью иммуногистохимии или методики FISH.
Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы
Учитывая положительные характеристики рецепторов PR, ER и отрицательные HER-2, крибриформные опухоли молочной железы относятся к люминальным.
На иммуногистохимических пятнах обычно отсутствуют миоэпителиальные клетки. Окрашивание также показывает, что решетчатые пространства не содержат материала базальной мембраны. Это говорит о том, что решетчатые опухолевые клетки имеют тенденцию не дифференцироваться в базалоидные клетки или лактирующий эпителий молочных желез.
Иммуногистохимическая диагностика инвазивного решетчатого рака молочной железы иногда основана на отрицательном иммуноцитохимическом окрашивании на ламинин, а также на ультраструктурных доказательствах дифференцировки просвета клетками, выстилающими кистозные пространства. По сути, это средство различения инвазивной крибриформной карциномы груди и аденоидно-кистозной карциномы груди. Отрицательное окрашивание ламинином предполагает отсутствие базальной пластинки вокруг островков опухолевых клеток и внутри кистоподобных пространств опухоли, что будет контрастировать с сильным положительным окрашиванием, наблюдаемым при аденоидно-кистозном раке молочной железы.
Если иммуногистохимическое окрашивание выявляет присутствие миоэпителиальных клеток, это может указывать на природу опухоли «in situ», а их отсутствие предполагает инвазивный контекст. Белковые красители, такие как кальпонин, p63 и тяжелая цепь гладкомышечного миозина, являются полезными маркерами для определения присутствия миоэпителиальных клеток в крибриформных карциномах молочной железы.
При анализе инвазивной крибриформной карциномы для миоэпителиальных клеток используются различные маркеры:
Маркер | Чувствительность | Специфичность |
Кальпонин | Превосходная | Очень хорошая |
р63 | Превосходная | Превосходная |
CD10 | Хорошая | Хорошая |
Цитокератин с высоким молекулярным весом | Очень хорошая | Низкая |
Маспин | Хорошая | Низкая |
S100 | Хорошая | Очень низкая |
Актин | Хорошая | Очень низкая |
E-кадгерин, по-видимому, является чувствительным маркером протоковой дифференцировки по сравнению с дольковой дифференцировкой, но его полезность при пограничных поражениях в настоящее время неизвестна.
Часто индекс маркировки Ki67 для инвазивных решетчатых карцином груди очень низкий. Этого можно ожидать при раке молочной железы «низкой степени», таком как чисто инвазивная решетчатая карцинома молочной железы. По результатам одного из исследований, индекс пролиферации Ki-67 находился в диапазоне от 2% до 20%, среди которых 58% (7/12) случаев имели ki67≤14%, а 42% (5/12) случаев имели Ki67>14%.
Ki-67 представляет собой ядерный антиген, который связан с потенциалом роста многих раковых опухолей и является маркером пролиферации, экспрессируемым только в циклических клетках. Как следствие, количественная оценка окрашивания Ki-67 на залитых парафином срезах опухоли молочной железы может дать довольно точную оценку индекса пролиферации отдельной опухоли рака молочной железы.
Чтобы исключить нейроэндокринную дифференцировку, проводят тестирование на наличие нейроэндокринных маркеров, таких как CD56, CgA и Syn, все результаты являются отрицательными.
Расшифровка результатов анализа (для специалистов!*)
Целый ряд лекарственных препаратов может приводить к ложноположительному повышению уровня ANA: аминосалицилаты, карбомазепин, хлопромазин, изониазид, альдомет, метилдопа, прокаинамид, иодиды, оральные контрацептивы, тетрациклины, тиазидные диуретики, сульфаниламиды. Ложноповышенные титры антител к нуклеарным антигенам могут быть получены у пациентов, получающих B-адреноблокаторы, карбамазепин, метилдопа, нифедипин, гидралазин, нитрофурантоин, пеницилламин, вследствие способности этих препаратов вызывать интерференцию при проведении исследования.
Интерпретация результатов:
- Повышение референсных значений: Комбинированный тест «Скрининг системных ревматических заболеваний» позволяет выявлять антинуклеарные антитела у 90-98% пациентов с системными ревматическими заболеваниями. Выявление положительных титров АНФ или ЭНА требует проведения дообследования с помощью иммуноблота антинуклеарных антител, антител к двуспиральной ДНК, антикардиолипиновых антител, иммуноблота антител при склеродермии, иммуноблота антител при полимиозите (см.описание отдельных тестов).
- Понижение референсных значений: Отрицательный результат тестов, входящих в данную панель, значительно снижает вероятность диагноза системной красной волчанки (СКВ) и других системных ревматических заболеваниях, что делает этот метод удобным средством для исключения системных заболеваний при неясной клинической картине: лихорадке неясного генеза, высыпаниях и алопеции, артрите и артралгиях, полисерозите, поражении почек и т. д.
Для интерпретации результатов исследования – обращайтесь к своему лечащему врачу!
Референсные значения (норма)
* Расшифровка результатов предназначена для вашего лечащего врача, который определит точный диагноз и назначит схему лечения, учитывая результаты не только данного анализа, но и всего комплекса исследований для вашего конкретного случая. Не ставьте сами себе диагноз — обязательно обратитесь к врачу!
Изучение полученных результатов
После проведения всех необходимых процедур – взятия биоматериала и его лабораторной подготовке к исследованию, проводится оценка и интерпретация результатов. Сюда входит определение титра (концентрации) антител и типа свечения. Значимым параметром для диагностики является показатель концентрации свыше 1:160. К примеру, при обострении ревматизма он может превышать отметку 1:640, тогда как в ремиссионном периоде наблюдается понижение до 1:160–1:320.
Тип свечения показывает мишени АНА, что является особо важным клиническим моментом, направляющим последующие действия врача в назначении диагностических мероприятий. По характеру свечения ядер при использовании НЕр-2 определится свыше 20 вариантов ядерного окрашивания, в зависимости от видов присутствующих антител в биоматериале. К основным из них относятся следующие типы свечения.
- Периферическое. Свечение свидетельствует о наличии анти-ДНК-антител, что подтверждает СКВ. Основным видом антигенов для периферического типа являются гистоновые белки и ДНК.
- Диффузное (гомогенное). Такое свечение наблюдается при СКВ, сопровождающейся поражением структуры почек и похожих ЗСТ, нефрите, склеродермии, а также лекарственно-индуцированной СКВ. Антигены при данном типе представлены дсДНК, гистонатами и нуклеосомами.
- Ядрышковое (нуклеарное). Данный тип характерен для системной формы склеродермии, и определяется при присутствии у пациентов антител – PHК полимераза 1, PM/Scl, NOR, U3RNP.
- Цитоплазматическое. Подобный тип подсвечивания указывает на наличие АНА к тРНК–синтетазам, а именно Jo-1, и наблюдается при полимиозите.
- Гранулярное. Определяется при синдроме Шегрена, инфекционном мононуклеозе, смешанном ЗСТ (Sharp-синдром, MCTD) и лекарственном волчаночном синдроме. Преимущественно присутствующие антигены для этого типа – SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP, и PCNA.
- Крупногранулярное. Характерно для смешанных ЗСТ и, по мнению многих ученых, связано с наличием антигена RNP.
- Мелкогранулярное. Определяется присутствие антител, образующихся против рибонуклеиновых белков – АSSP (АЦЦП), SS-A, SS-B и других. Такие антитела характерны для СКВ, также ее специфических кожных формах, ревматоидном артрите, склеродермии, полимиозите, синдроме Шегрена.
- Центромерное. Данный тип в основном отмечается при склеродермии. Хотя в одном образце крови, особенно у обследуемых с диффузными ЗСТ, в отделенной плазме могут определяться антитела к различным ядерным компонентам.
- Точечные вкрапления в ядре. Этот тип преимущественно выявляется при болезнях печени аутоиммунного характера. При нем могут сочетаться несколько флюоресцентных типов, к примеру, ядрышковый и мелкогранулярный, что обусловлено антителами к Scl-70.
Справка! Отмечено, что при увеличении разведения плазменного биоматериала параметры свечения могут видоизменяться, так как для многих антител характерна смена активности при разной степени концентрации.
Антиядерные антитела, скрининг Antibodies against nuclear antigens (ANAs, EIA)
Антиядерные антитела, скрининг Antibodies against nuclear antigens (ANAs, EIA) – группа антител, действие которых направлено против компонентов ядер собственных клеток (белков рибосом, белков мембраны ядрышка, нуклеиновых кислот). ANA представлены преимущественно иммуноглобулинами классов Gи M.
Их обнаруживают в крови людей с системными болезнями соединительной ткани, первичным билиарным циррозом, со злокачественными опухолями. Оценка уровня антиядерных антител проводится у пациентов с признаками аутоиммунного процесса: лихорадкой неясного происхождения, поражением суставов, высыпаниями на коже. Повышенный уровень антиядерных антител служит основанием для более детального диагностического поиска, поскольку ANA указывают лишь на наличие аутоиммунного заболевания в организме, но не характерны только для одного из них. При этом отрицательный результат анализа на антиядерные антитела (их отсутствие в крови пациента) не исключает вероятности аутоиммунного процесса в организме.
ANA выявляются при системной красной волчанке чаще, чем при других заболеваниях. Их можно выявить примерно у 98% заболевших. Если первый анализ на ANA положительный, а второй – отрицательный, СКВ обычно исключается. Если же оба раза анализ отрицательный, СКВ возможна (в среднем у 2% пациентов с данным заболеванием). При диагностическом поиске анализ на ANA лишь указывает направление, а конкретизировать диагноз следует более специфичными методами исследования.
ANA обнаруживаются у больных с системными болезнями соединительной ткани (СКВ, синдром Шегрена, системная склеродермия, ревматоидный артрит, полимиозит). Небольшие титры антинуклеарных антител , то есть небольшое повышение их концентрации в крови, появляются при приёме лекарственных препаратов – пенициллина, фенитоина, прокаинамида, гидралазина; при опухолевых процессах; при хронических болезнях печени и некоторых вирусных инфекциях. У пожилых людей также встречается незначительное повышение титров ANA.
Диагностика системной красной волчанки.
Диагностический поиск при наличии симптомов аутоиммунного процесса.
Подготовка к исследованию
От последнего приёма пищи до взятия крови временной промежуток должен быть более восьми часов.
Накануне исключить из рациона питания жирные продукты, не принимать спиртные напитки.
За 1 час перед взятием крови на анализ нельзя курить.
Не рекомендуется сдавать кровь сразу после выполнения флюорографии, рентгенографии, УЗИ, физиотерапевтических процедур.
Кровь на исследование сдают утром натощак, исключается даже чай или кофе.
Допустимо пить обычную воду.
За 20-30 минут до исследования пациенту рекомендован эмоциональный и физический покой.
Интерпретация результатов
Результат анализа выдаётся в виде «отрицательно» или «положительно». Отрицательный ответ указывает на отсутствие антиядерных антител в крови пациента, положительный – на их обнаружение.
Норма: отрицательный результат.
Положительный результат:
- Системная красная волчанка.
- Синдром Шегрена.
- Системная склеродермия.
- Полимиозит, дерматомиозит.
- Лекарственно индуцированная красная волчанка.
- Ревматоидный артрит.
- Инфекционные заболевания – активный гепатит, туберкулёз, ВИЧ-инфекция.
- Лёгочный фиброз.
- Пожилой возраст.
- Приём лекарственных препаратов: прокаинамида, фенитоина, пенициллина, гидралазина.
АНА ИЛИ АНТИЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА
— системная красная волчанка (СКВ), — ревматоидный артрит,- синдром Шегрена, — склеродермия,- дерматомиозит,- узелковый периартериит и др.;
- Инфекции (туберкулез, инфекционный мононуклеоз, острый и особенно хронический вирусный гепатит, подострый инфекционный эндокардит, ВИЧ-инфекция и др.);
- Хронический аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз печени;
- Сахарный диабет (инсулинзависимый);
- Множественный склероз;
- Легочной фиброз;
- Системные васкулиты.
Антинуклеарные антитела также могут выявляться при острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, малярии, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.Титры антинуклеарных антител при узелковом периартериите могут достигать 1:100, при дерматомиозите — 1:500, СКВ — 1:1000 и выше. При СКВ тест на выявление антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции обладает высокой степенью чувствительности (до 98% по данным разных авторов), но умеренной специфичностью (78%), так как антинуклеарные антитела могут встречаться и при других, указанных выше, заболеваниях. Для сравнения, тест определения антител к нативной ДНК с помощью ИФА в диагностике СКВ обладает значительно меньшей чувствительностью — 38% (т.к. патогенетическую роль в развитии СКВ могут играть не только антитела к ДНК, но и антитела к гистонам, дезоксирибонуклеопротеину и многим другим ядерным антигенам); однако специфичность определения антител к нативной ДНК для диагноза СКВ является почти абсолютной (98%). Клиническая интерпретация этих различий в чувствительности и специфичности разных лабораторных тестов в диагностике СКВ выглядит следующим образом: отрицательный результат обнаружения антител к нативной ДНК с помощью ИФА не исключает диагноз СКВ, обнаружение же этих антител практически со 100% вероятностью подтверждает диагноз. Другая ситуация имеется в отношении АНФ: отрицательный (особенно многократный) результат обнаружения антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции делает диагноз СКВ (во всяком случае, активной формы) весьма сомнительным (т.к. метод обнаруживает практически все аутоантитела, встречающиеся при СКВ), обнаружение же антинуклеарных антител не всегда будет достаточным основанием для постановки диагноза СКВ, оно подтверждает наличие феномена аутоиммунитета и обычно требует для установления окончательного диагноза дальнейшей клинико-лабораторной дифференциации с учетом типа свечения, титра антител, проведения дополнительных уточняющих или подтверждающих тестов, рекомендованных лабораторией, сопоставления результатов с клинической картиной.При СКВ корреляция между величиной титра ANA и клиническим состоянием обычно отсутствует, хотя сохранение высоких титров в течение длительного времени является неблагоприятным прогностическим признаком. Снижение уровня антител предвещает ремиссию, но иногда — летальный исход (феномен потребления антител: при нарастающем аутоиммунном повреждении тканей темп высвобождения ядерных антигенов, с которыми связываются наработанные антиядерные антитела, превышает скорость синтеза новых аутоантител).При склеродермии частота выявления антител к ядерным антигенам составляет 60-80%, их титр обычно ниже, чем при СКВ. При ревматоидном артрите часто встречаются СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляются ANA. При дерматомиозите антитела к ядерным антигенам в крови встречаются в 20-60% случаев, при узелковом периартериите — в 17% (титр до 1:100), при болезни Шегрена — в 56% в сочетании с артритом и в 88% случаев — при комбинации с синдромом Гужеро-Шегрена. При дискоидной (кожной) красной волчанке антинуклеарный фактор выявляется у 50% больных.Частота обнаружения антинуклеарных антител при ревматическихзаболеваниях и у здоровых лиц (Насонова В.А. и др., 1997)
Заболевание | Частота выявления ANA, % | Титры |
СКВ — активная форма | 98-100 | +++ |
Дискоидная красная волчанка | 40 | ++, +++ |
Лекарственная волчанка | 100 | ++ |
Системная склеродермия | 70 | ++, +++ |
Синдром Шегрена | 60 | ++, +++ |
Смешанное заболевание соединительной ткани | 100 | ++, +++ |
Болезнь Рейно | 60 | ++, +++ |
Ревматоидный артрит | 40 | +, ++ |
Ювенильный хронический артрит | 20 | +, ++ |
Полимиозит и дерматомиозит | 30 | + |
Узелковый периартериит | 17 | + |
Здоровые лица до 40 лет | 3 | + |
Здоровые лица после 40 лет | 25 | + |
Ревматоидный фактор
Исследование крови на ревматоидный фактор направлено на выявление специфических антител класса IgM к антителам класса IgG.
Лабораторный тест на ревматоидный фактор является скрининговым исследованием, направленным на выявление аутоиммунных нарушений. Главная задача исследования на ревматоидный фактор – выявление ревматоидного артрита, болезни и синдрома Шегрена и ряда других аутоиммунных болезней.
Анализ на ревматоидный фактор может потребоваться при следующих симптомах:
- боли и отечность в суставах;
- ограничение подвижности в суставах;
- чувство сухости в глазах и во рту;
- кожные высыпания по типу кровоизлияний;
- слабость, упадок сил.
1
Ревматоидный артрит
2
Ревматологическое обследование
3
Ревматологическое обследование
Нормы ревматоидного фактора в крови
Теоретически в здоровом организме ревматоидного фактора быть не должно. Но все же в крови у некоторых даже здоровых людей этот фактор присутствует в небольшом титре. В зависимости от лаборатории верхняя граница нормы ревматодного фактора варьирует от 10 до 25 международных единиц (МЕ) на 1 миллилитр крови.
Ревматоидный фактор одинаковый у женщин и мужчин. У людей пожилого возраста показатель ревматоидного фактора будет несколько выше.
Ревматоидный фактор у ребенка должен составлять в норме 12,5 МЕ на миллилитр.
Анализ на ревматоидный фактор используется для диагностики следующих заболеваний:
- ревматоидный артрит;
- системные аутоиммунные заболевания;
- риоглобулинемия.
Другие причины повышения ревматоидного фактора
Дополнительные причины повышения ревматоидного фактора могут быть следующими:
- сифилис;
- краснуха;
- инфекционный мононуклеоз;
- малярия;
- туберкулез;
- грипп;
- гепатит;
- лейкемия;
- цирроз печени;
- сепсис
Если причина повышенного ревматоидного фактора – инфекционные заболевания, например, инфекционный мононуклеоз, то титр ревматоидного фактора обычно меньше, чем при ревматоидном артрите.
Тем не менее, анализ на ревматоидный фактор прежде всего помогает распознать ревматоидный артрит. Однако следует подчеркнуть, что ставить диагноз лишь на его основании нельзя. Поскольку ревматоидный фактор может быть повышенным при многих других патологических состояниях аутоиммунной и не аутоиммунной природы. Кроме этого, примерно у 30% больных ревматоидным артритом анализ крови на ревматоидный фактор может оказаться отрицательным (серонегативный вариант ревматоидного артрита).
Анализ крови на ревматоидный фактор проводят утром натощак (с последнего приема пищи должно пройти от 8 до 12 часов).
Показания к назначению
Что это такое «иммуноблот» уже выяснили, но кому назначают данное исследование? Поводом сдать анализы на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) методом иммуноблоттинга становится положительный результат ИФА. Необходимо пройти через иммуноферментный анализ пациентам, которые будут оперироваться. Кроме этого, следует сделать анализ женщинам, планирующим беременность, а также всем, кто ведет беспорядочную половую жизнь. Назначают иммуноблоттинг пациентам с ВИЧ, если результаты ИФА вызывают сомнения. Поводом для обращения к врачу могут стать следующие тревожные симптомы:
- резкое похудение;
- слабость, потеря работоспособности;
- расстройство кишечника (диарея), которое продолжается в течение трех недель;
- обезвоживание организма;
- лихорадка;
- увеличение лимфатических узлов на теле;
- развитие кандидоза, туберкулеза, пневмонии, токсоплазмоза, обострение герпеса.
Пациенту не нужно подготавливаться перед сдачей венозной крови. За 8-10 часов до исследования нельзя принимать пищу. Не рекомендуется за сутки до сдачи крови употреблять алкогольные и кофейные напитки, заниматься тяжелыми физическими упражнениями, испытывать волнение.
Повышение показателя
Интерпретация повышенного показателя теста зависит от метода исследования. При определении уровня суммарных ANA причиной увеличения их концентрации являются:
- Аутоиммунные заболевания. Положительный результат выявляет СКВ, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, склеродермию, сахарный диабет 1 типа, полимиозит, дерматомиозит, миастению, поражение щитовидной железы, печени.
- Инфекции. Повышение значения определяется у людей с туберкулезом, вирусным гепатитом, подострым бактериальным эндокардитом, ВИЧ-инфекцией.
- Онкопатологии. Образование АНА наиболее характерно для рака легких и печени.
- Прием лекарственных препаратов. Показатель теста растет при использовании ингибиторов АПФ, бета-блокаторов, гидралазина, пропилтиоурацила, хлорпромазина, лития, карбамазепина, фенитоина, изониазида, миноциклина, гидрохлортиазида, ловастатина, симвастатина.
При анализе с определением вида антинуклеарных антител интерпретируется повышение отдельных показателей. При иммуноблоттинге выполняется разделение видов АТ. При РНИФ преобладающие АТ выявляются по характеру свечения. Причинами отклонения результатов от нормы могут быть СКВ, синдром Шарпа, синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, неонатальный волчаночноподобный синдром, полимиозит, изолированный синдром Рейно, волчаночный нефрит, CREST-синдром, полимиозит, дерматомиозит, лекарственная волчанка, билиарный цирроз.
Категории
АллергологАнестезиолог-реаниматологВенерологГастроэнтерологГематологГенетикГепатологГинекологГомеопатДерматологДетский гастроэнтерологДетский гинекологДетский дерматологДетский инфекционистДетский кардиологДетский лорДетский неврологДетский нефрологДетский офтальмологДетский психологДетский пульмонологДетский ревматологДетский урологДетский хирургДетский эндокринологДиетологИммунологИнфекционистКардиологКлинический психологКосметологЛогопедЛорМаммологМедицинский юристНаркологНевропатологНейрохирургНефрологНутрициологОнкологОнкоурологОртопед-травматологОфтальмологПаразитологПедиатрПластический хирургПроктологПсихиатрПсихологПульмонологРевматологРентгенологРепродуктологСексолог-АндрологСтоматологТерапевтТрихологУрологФармацевтФизиотерапевтФитотерапевтФлебологФтизиатрХирургЭндокринолог
Механизм образования
Антинуклеарные антитела и рецепторы
В норме собственные клетки организма даже в разрушенном состоянии иммунного ответа не вызывают. Однако сбои в работе иммунной системы наблюдаются постоянно даже у здоровых лиц, и при неблагоприятном стечении обстоятельств иммунитет может сформироваться на любой из компонентов клетки. В организме предусмотрена своеобразная система «отбраковки» патологических антител, в большинстве случаев она срабатывает, антитела уничтожаются, не вызывая болезнь.
Однако в некоторых случаях антинуклеарные антитела возникают в больших количествах и оказываются вовремя не распознаны организмом как патологические. Чаще всего это бывает при обширных солнечных ожогах, когда миллионы клеток кожи оказываются повреждены ультрафиолетом. Ядра погибших клеток оказываются непосредственно во внутренней межклеточной среде организма, где их встречают иммунные клетки — лимфоциты и макрофаги.
ДНК из ядер, гистоновые белки и другие белковые и нуклеиновые компоненты могут быть настолько повреждены ультрафиолетовым излучением, что в некоторых случаях изменяются до неузнаваемости. Именно это и провоцирует иммунные клетки вырабатывать против них антитела, как против чужеродных веществ.
Показания к проведению исследования
Трактовать результаты вправе врач иммунолог и любой дипломированный специалист, в зависимости от области поражения.
Показаниями для проведения данного исследования служат:
- Выявление системных заболеваний, а также аутоиммунных нарушений без явных симптомов.
- Обнаружение системной красной волчанки и ее комплексное исследование, подбор стратегии лечения.
- Выявление лекарственной волчанки.
- Наличие определенных клинических проявлений, таких как, длительная лихорадка без явной на то причины, ломкость суставов и их болезненность, кожная сыпь, ломота мышц, высокая степень утомляемости.
- Признаки симптоматических проявлений смешанных заболеваний: болезни кожи и внутренних органов, судорожные состояния, увеличение температурных показателей.
- Назначение медикаментов дизопирамид, гидралазином и прочее.
Нормальные значения АНА
Нормальным значением является полное отсутствие антинуклеарных антител. При скрининговом ИФА-исследовании отрицательный ответ чаще всего записывается с указанием титра (разведения), пример: «Отрицательно, Причины повышения ANA
Положительный результат анализа может свидетельствовать о наличии одного или нескольких следующих заболеваний:
- системная красная волчанка,
- лекарственная волчанка,
- синдром или болезнь Шегрена,
- системная склеродермия,
- синдром Шарпа.
Слабоположительный результат может быть вызван как наличием вышеперечисленных заболеваний, так и заболеваниями, не связанными с системой иммунитета. Перечислим основные болезни, которые могут его вызвать:
- ревматоидный артрит, в том числе ювенильный (детский),
- первичная легочная гипертензия,
- идиопатический легочной фиброз,
- синдром Рейно (дигитальный васкулит),
- болезнь Крона,
- узелковый периартериит,
- гепатиты различной природы,
- злокачественные новообразования (опухоли),
- некоторые инфекционные болезни (туберкулез, шистосомоз, малярия).
Слабоположительный результат анализа иногда выявляется у здоровых лиц, чаще у женщин в возрасте старше 60 лет.
Что показывает
АНФ-анализ крови позволяет выявить патологии аутоиммунного характера. Исследование информативно в отношении следующих заболеваний:
- Системной красной волчанки.
- Острого рассеянного энцефаломиелита.
- Болезни Шегрена.
- Ревматоидного артрита.
- Очаговой алопеции.
- Болезни Аддисона.
- Анкилозирующего спондилита.
- Антифосфолипидного синдрома.
- Аутоиммунной гемолитической анемии.
- Буллезного пемфигоида.
- Аутоиммунного гепатита.
- Глютеновой болезни.
- Аутоиммунных патологий внутреннего уха.
- Болезни Чагаса.
- Синдрома Черджа-Стросса.
- Хронической обструктивной болезни легких.
- Дерматомиозита.
- Болезни Крона.
- Сахарного диабета I типа.
- Синдрома Гудпасчера.
- Тиреоидита Хашимото.
- Базедовой болезни.
- Синдрома Гийена-Барре.
- Болезни Кавасаки.
- Гнойного гидраденита.
- Первичной нефропатии.
- Идиопатической тромбоцитопенической пурпуры.
- Интерстициального цистита.
- Эритематозной волчанки.
- Синдрома Шарпа.
- Кольцевидной склеродермии.
- Рассеянного склероза.
- Нарколепсии.
- Нейромиотонии.
- Обыкновенной пузырчатки.
- Псориаза.
- Феномена Рейно.
- Васкулита.
- Гранулематоза Вегенера.
Это неполный список заболеваний
Важно, что анализ АНФ показывает развитие аутоиммунных патологий на самой ранней стадии их течения. Это позволяет врачу определиться с тактикой лечения, а в дальнейшем оценить его эффективность
Иммуноблот на антиядерные антитела
Это методика лабораторного исследования крови на наличие антител к ВИЧ. Является более точным анализом, чем ИФА, и применяется для подтверждения результата ИФА. Иммуноблотинг (вестерн-блот) применяется при диагностике ВИЧ-инфекций, определения уровня антиядерных антител, в качестве вспомогательного экспертного метода, который призван подтверждать результат ИФА. Как правило, данной методикой перепроверяют положительные результаты при ИФА, так как она считается более специфичной и чувствительной.
Иммунный блоттинг комбинирует в себе иммуноферментный анализ с электрофоретическим разделением вирусных белков в геле и переносом их на нитроцеллюлозные мембраны. Иммуноблот состоит из нескольких этапов. Сначала очищенный и разрушенный белок подвергается электрофорезу, при котором входящие в его состав антигены разделяются на молекулы. Затем способом блоттинга антигены переносятся из геля на полоску нейлонового фильтра или нитроцеллюлозы, которые содержат определенный спектр белков.
Далее на стрип наносят исследуемый материал, и если в пробе присутствуют специфические антитела, они начинают связываться с соответствующими им полосками антигенов. Результат такого взаимодействия делается видимым. Присутствие полос на некоторых участках стрипа подтверждает наличие в исследованной крови антител к определенным антигенам. Иммунный блоттинг часто используется для подтверждения ВИЧ-инфекции. Положительными считаются сыворотки крови, в которых посредством иммунного блотинга обнаруживают антитела к двум белкам оболочки ВИЧ. Если скрининг положительный, значит, в организме развивается определенное аутоиммунное заболевание.
Подготовка к анализу и методика проведения исследования
Определение антител может быть выполнено в нескольких вариантах
Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.
Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.
Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.
Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.
Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.
Диагностика иммунологического бесплодия
Определением и лечением такого состояния занимаются врачи гинекологи, андрологи и иммунологи. Для диагностики нарушения назначаются:
- Ультразвуковые исследования. Женщине исследуют органы малого таза, а мужчине – мошонку и предстательную железу.
- ПЦР-анализ, выявляющий ЗППП. Его также должны сдавать оба партнера. Исследование выявляет инфекционные процессы, в том числе имеющие скрытое или бессимптомное течение.
- Анализы на антиспермальные антитела, влияющие на жизнеспособность, выработку и функции сперматозоидов. Поскольку такие вещества вырабатываются в женском и мужском организме, анализ сдают оба партнера. Перед проведением исследования нужно примерно на неделю прекратить прием гормональных, противовоспалительных и других препаратов, которые могут повлиять на результат. Для исследования берется кровь, семенная жидкость у мужчин и слизь из цервикального канала у женщин.
- Проводится спермограмма – исследование эякулята, в котором определяют количество сперматозоидов, их подвижность, наличие деформированных, нежизнеспособных и неправильно развитых спермиев. Указываются также основные параметры семенной жидкости – кислотность, плотность, время разжижения, вязкость. Также определяется количество кровяных телец – эритроцитов и лейкоцитов.