Серологический анализ крови что в него входит

Подготовка к исследованию

Чаще биологическим материалом служит кровь, реже слюна, кал, моча, срезы тканей, альвеолярные смывы, спинномозговая, амниотическая жидкости. Серологические исследования включают в себя множество методов выявления возбудителей, от этого зависят определенные правила подготовки. Общие рекомендации перед серологическими тестами:

• последний прием пищи за 9-12 часов;
• за 24 часа ограничить употребление жирной, жареной, соленой, острой пищи, алкогольных напитков;
• в день сдачи крови нельзя есть, разрешено пить обычную негазированную воду;
• по возможности не курить за 10 часов до сдачи;
• прекратить прием любых лекарственных препаратов, в том числе витаминов. Если медикаменты назначены на постоянной основе и прекратить прием нельзя, предупредить врача;
• за 24 часа избегать стресса, исключить физические нагрузки.

Желательно, чтобы перед сдачей человек находился в спокойном состоянии, так как при любых эмоциональных проявлениях в кровь выделяются гормональные вещества, белки (кортизол, адреналин, норадреналин и др.). Если назначены инструментальные методы диагностики, то в первую очередь сдают кровь, чтобы последующие обследования не повлияли на результат анализа.

Расшифровка результатов

Для правильной постановки диагноза серологические реакции должны расшифровываться квалифицированным специалистом. Выявление антител еще не говорит о наличии заболевания, в некоторых случаях циркуляция иммуноглобулинов в крови — это норма. Так, в нашем организме постоянно присутствуют антитела IgM от кори, ветряной оспы и т.д. Они являются маркером перенесенной инфекции и защищают нас от повторного инфицирования. Поэтому учет результатов анализа крови и расшифровка серологического исследования должны проводиться индивидуально для каждого пациента.

Однако существуют определенные серологические маркеры инфекционных заболеваний:

• Выявление в крови иммуноглобулинов класса A к вирусу или бактерии свидетельствует об остром инфекционном процессе, длящемся не более 14-ти дней.
• Если в крови найдены иммуноглобулины класса M, то требуется расширенная лабораторная диагностика, потому что эти антитела – маркер как уже перенесенной болезни, так и длительного инфицирования.
• Нарастание титра антител в 4 и более раз в двух последовательно взятых анализах крови говорит о наличии инфекционного заболевания.
• Выявление любых антигенов патогена свидетельствует о том, что возбудитель присутствует в организме.

В случае неясной диагностической картины проводятся повторные серологические тесты или обследование дополняется другими методами исследования (ПЦР, бакпосев и т.д.)

Основные методы серологической диагностики

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Данная реакция является непрямым вариантом серологического исследования, то есть, производится она в два этапа. На первом этапе производят выявление необходимого антитела в циркулирующем комплексе антиген – антитело с помощью антиглобулина, схожего по своей структуре с белками иммунной сыворотки. Выявление искомого антитела возможно также при изучении заранее приготовленного антигенного препарата под люминесцентным микроскопом, без использования антиглобулинов.

Иммунофлюоресцентная реакция – очень трудоёмкий процесс, требующий от специалиста немало времени и ответственности. Начинается реакция с подготовки растворов, затем сыворотки и их контрольные образцы подвергаются титрованию (процесс, позволяющий определить содержание определённого вещества путём постепенного смешивания исследуемого раствора с контролируемым количеством реагента). Подготовленные ранее разведения и их контрольные образцы аккуратно наносятся на предметные стёкла с антигеном. Потом препараты подвергаются инкубации, затем следует их отмывание и высушивание на воздухе. На стёкла с антигеном тонким слоем наносится антисыворотка, после этого производится вторичная инкубация препаратов и, вся предыдущая цепь действий повторяется, завершаясь высушиванием препарата. В результате препарат на предметном стекле подвергается обработке глицерином и исследуется в люминесцентном микроскопе.

Результаты проведённой реакции оцениваются по четырёх бальной шкале, которая характеризуется интенсивностью поверхностного жёлто-зелёного свечения клеток антигенов: + очень слабое свечение клетки, заметное только на её периферии ++ слабое свечение периферии клетки, но с явно заметным зелёным оттенком +++/++++ яркое свечение зелёного цвета периферии клетки Титром реакции считается такое разведение сыворотки, где не менее 50 % клеток антигена проявляют чёткое поверхностное свечение, то есть результат реакции +++ или ++++. Значение тира реакции от 1/80 до 1/100.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

Интенсивность реакции зависит от количества осаждённых эритроцитов на дне образованных лунок: – отрицательная реакция, которая характеризуется осаждением эритроцитов на дно лунок в виде небольшого колечка с гладкими краями или «пуговки» + слабая интенсивность, для данной реакции характерны небольшие одиночные отложения на дне лунки. Неагглютинированные эритроциты образовывают «маленькое колечко» в центре лунки ++ средняя интенсивность, ей свойственно образование на дне лунки «широкого плотного кольца» из неагглютинированных эритроцитов +++ интенсивная реакция, агглютинированные эритроциты образуют так называемые «зонтики», в центре которых, явно видны кольца, образованные осевшими неагглютинированными эритроцитами ++++ резко интенсивная реакция, в которой агглютинируются все эритроциты и, образуя «зонтики», выстилают дно лунок. Титром данной реакции считают последнее разведение сыворотки, при котором выявляется явная агглютинация эритроцитов не менее +++, то есть при интенсивной или резко интенсивной реакции.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

субстрата

Достоверность и качество методов серологической диагностики зависят от организации проведённого внутреннего и внешнего лабораторного контроля, состоящих из нескольких независимых процедур, предназначенных для оценки качества результатов проведённого анализа.

источник

Методы проведения СИ

Серологические анализы подразделяются на количественные и качественные. Качественные дают однозначный ответ о наличии или отсутствии в организме антител (Ат), антигенов (Аг). Количественные результаты отображаются в виде чисел со знаками + в количестве от 1 до 4. Самые распространенные в современной медицине методы СИ:

1. Агглютинация. Основана на принципе связывания Ат, Аг; что дает выпадение хлопьеобразного осадка в сыворотке.
2. Гемагглютинация. Применяются адсорбированные эритроциты.
3. Преципитация. Образование помутнения от связки Аг с Ат.
4. Коагглютинация. Выявление негативных антигенов при сывороточном введение антител, широко распространена адсорбция на белке стафилококка.
5. Подавление гемагглютинации. Подавление соединительной функции Аг со свободными эритроцитами.
6. Непрямая реакция Кумбса. Определение антител к антигенам эритроцитов.
7. Кольцепреципитация. Наслоение антигенов на лечебную сыворотку.
8. Двойная радиальная иммунодиффузия. Проникновение антигенов в лунки агар-агар питательной среды, растворенной в сыворотке
9. Реакция связывания комплемента. Индикатор – эритроциты барана в гемолитической сыворотке, который сигнализирует о смешивании предполагаемых Аг и Ат иммунитета.
10. Нейтрализация вирусов родными антителами.
11. Маркирование Ат и Аг флуоресцентным или ферментным составом. Иммунофлюоресцентный РИФ, иммуноферментный ИФА методы.

В сложных случаях – неясной клинической картине, высокой пандемичности и молниеносном распространении инфекции, специалистами лаборатории может быть принято решение о проверке одного показателя несколькими разными методами.

Обратите внимание! 

Серологический анализ крови является инструментом подтверждения или опровержения диагноза, но никак не способом первичной постановки.

Норма референтных показателей для каждого из методов подбирается индивидуально, зависит от пола, возраста, физиологического состояния больного. обследуемой болезни.

Иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы

Антитела, помеченные светящимся раствором, вводятся в сыворотку. В качестве меток чаще всего применяют флуороционат, который придает клеткам зеленое свечение под ультрафиолетовой лампой. Результат анализа качественный, базируется на яркости свечения. РИФ проводят прямым, непрямым методами, при котором сначала вводят обычные АТ, а затем маркированные для избежания неспецифической реакции цепи.

Метод ИФА основан на выявлении антител, антигенов путем маркирования ферментом какой-либо клетки. В результате химических реакций образуются окрашивания сыворотки в зависимости от того, есть ли злокачественные Аг и какие именно. В свою очередь, ИФА подразделяется на гомогенный и гетерогенны способ. Гомогенно исследуют в жидком растворе, а гетерогенно на твердой основе.

Вирус Эпштейна-Барра

Возбудитель, поражая B-лимфоциты, становится причиной развития следующих патологий:

• мононуклеоз инфекционный;
• лейкоплакия волосатая;
• карцинома назофарингеальная;
• болезнь Ходжкина;
• и др.

В основном инфекция протекает бессимптомно. Четыре вида антигенов свойственны вирусу Эпштейна-Барра. Антитела IgM, а также IgG синтезируются на каждый из них. Первоначально они вырабатываются к капсидному антигену вируса, а далее и к другим. Определяются антитела к вирусу Эпштейна-Барр посредством анализа сыворотки крови. У всех вирусов герпеса схожие признаки, поэтому для выявления конкретного проводят дифференциальную диагностику. Высокий уровень этих компонентов выявляется в течение первых дней или шести недель после появления вируса в крови. Антитела класса IgM диагностируются до появления клинической картины. Через четырнадцать дней после инфицирования их концентрация постепенно уменьшается. Полностью они пропадают примерно через шесть месяцев после исчезновения симптомов заболевания.

Антитела есть в каждом организме, по их классу и количеству диагностируют то или иное заболевание. Кроме того, он ответственны иммунитет человека. Анализ биоматериала на обнаружение титра антител – это информативный и очень точный способ лабораторного исследования.

источник

Преимущества и недостатки

Серологический метод лабораторной диагностики имеет большое количество плюсов, что глубоко внедрило его в практическое использование во всех отраслях медицины: гинекологию, урологию, инфектологию и венерологию.

Серодиагностика является общедоступным анализом, позволяющим быстро получить точные результаты. Она не требует длительной подготовки к забору материала и легко переносится всеми пациентами. Для забора венозной крови от пациента требуется соблюдать диету лишь в течение 48 часов. Серологические реакции также обладают высокой специфичностью (100%), чувствительностью (95%) и точностью (90-95%).

Но этот анализ венозной крови требует больших затрат дорогих диагностикумов, что влияет и на его себестоимость. Некоторые возбудители обладают слабой иммуногенностью, то есть в организме к ним вырабатывается мало антител, поэтому проведение серодиагностики невозможно. Кроме того, метод значительно реже используется при вирусных инфекционных патологиях, уступая по эффективности ПЦР-анализу.

Методы серологических исследований

Способов проведения диагностики множество, как и заболеваний, которые они выявляют. Наиболее значимые:

1. Агглютинация.
2. Преципитация
3. Гемагглютинация.
4. Торможение гемагглютинации.
5. Непрямая реакция Кумбса.
6. Коагглютинация.
7. Преципитация.
8. Двойная радиальная иммунодиффузия.
9. Реакция связывания комплемента (РСК).
10. Иммунофлюоресценция (РИФ).
11. Иммуноферментный метод (ИФА).
12. Нейтрализация.

Чаще всего в лабораториях применяют ИФА, РИФ, РСК, реакции агглютинации.

Иммунофлюоресцентный метод (РИФ)

Для проведения исследования необходим биологический материал пациента, люминесцирующая жидкость. Второй компонент содержит антитела к предполагаемому возбудителю заболевания, которые помечены флуоресцеинизотиоционатом.

Виды РИФ:

1. Прямой – материал пациента смешивают с мечеными антителами, если это срез ткани, обрабатывают его поверхность. Если возбудитель присутствует, образуется светящийся комплекс.
2. Непрямой – проводят в 2 этапа. На первом в сыворотку или другой материал добавляют немеченые (первые) антитела. На втором вводят меченые (вторые) антитела против первых.

Полученные комплексы исследуют под люминесцентным, оптическим микроскопом ручным способом или автоматическим с помощью микрочипового цитометра. Из-за флуоресцентного вещества комплексы при затемнении излучают зеленое свечение, яркость которого отмечают плюсами от 1 до 4. Чем меньше плюсов, тем меньше комплексов с возбудителем заболевания.

Иммуноферментный метод

Как и РИФ, основан на маркировке чужеродного материала или белковых иммунных компонентов. В качестве маркировочного вещества выступают различные ферменты, которые имеют высокую специфичность, умеренную каталитическую активность, стабильность при образовании комплексов. Методы ИФА: гомогенные, гетерогенные. При первых все реакции происходят в жидком растворе. При вторых реакции проводят при участии твердого носителя.

Суть ИФА заключается в образовании комплексов иммунных белков человека с чужеродными антигенами сначала в жидком растворе, затем на твердой фазе. Под ней подразумевают прикрепление антигенов, антител к стенкам лунок полистиролового микропланшета. То есть после смешивания материала пациента с антителами против возбудителя смесь переносят на поверхность с лунками, куда прикрепляются антитела, антигены. Дальше изучают состав материала.

Реакция связывания комплимента

Для исследования необходимы: кровь или другой материал пациента, сыворотка с антителами, комплимент. Сначала смешивают кровь с сывороткой – образуется комплекс. После добавляют комплимент, который связывается с комплексом. Если связи между антиген-антитело не образуется, то комплемент остается в свободном, несвязанном состоянии. Чтобы определить его состояние в исследуемой жидкости, добавляют гемолитическую смесь (эритроциты барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент свободен, он соединяется с гемолитической смесью – реакция отрицательная, возбудитель не обнаружен.

Реакции, связанные с агглютинацией

Самые простые серологические реакции – с применением антибактериальной сыворотки. Исследуемую кровь пациента смешивают при комнатной температуре с различными сыворотками определенной концентрации. Результат оценивают по концентрации сыворотки, при которой произошла агглютинация. С помощью агглютинации определяют группу крови, резус-факторы.

Важно! 

Распространенным методом серологической диагностики являются реакции, основанные на феномене преципитации: иммуноэлектрофорез, иммунодиффузия и др.

Серологическое исследование крови в районе Москворечье — Братеево

Иммунологический или серологический метод диагностики представляет собой исследование крови, основой которого является изучение взаимодействия друг с другом антител и антигенов в организме человека. Во время проникновения в организм чужеродных объектов (вирусов, бактерий, грибов, аллергенов и прочих) иммунная система начинает активно бороться и защищаться, что сопровождается выработкой антител.В нашем медцентре в районе метро Борисоводля уточнения диагноза можно сдать развернутый анализ крови — иммунологическое исследование. Данный серологический анализ определит группу крови человека, аутоиммунные заболевания, наличие в организме опухолевых клеток, беременность.

Показания для проведения серодиагностики

Проведение серологического исследования крови целесообразно в таких ситуациях:

• пациент страдает частыми вирусными заболеваниями;
• инфекционный воспалительный процесс протекает длительно и плохо поддается лечению;
• появление высыпаний на коже аллергического характера;
• подозрение на аутоиммунные заболевания;
• гормональные сбои в организме;
• непереносимость некоторых лекарственных препаратов;
• сахарный диабет.

Иммунологический анализ крови проводится в обязательном порядке пациентам, которых готовят к операции или диагностическому хирургическому вмешательству.

Подготовка к серологическому анализу крови

Для того чтобы показатели исследования были верными, очень важно правильно подготовиться к исследованию. Кровь сдают строго натощак из вены

За 8-10 часов до проведения забора биологического материала пациенту запрещается есть, курить, принимать какие-либо лекарственные препараты и употреблять алкоголь. Кроме этого, рекомендуется за несколько дней до серодиагностики исключить стрессы и снизить физические нагрузки, в противном случае результаты анализа могут быть не информативными.

Методы выполнения серологических реакций

Методов проведения серологических анализов великое множество — какие-то из них наиболее информативные, иные имеют ряд недостатков и требуют больших затрат лаборатории. В нашем медицинском центре пациенту могут предложить следующие высокоточные методы серодиагностики:

1. Метод Кунса (РИФ, реакция иммунофлюоресценции)  — исследование проводится прямым и непрямым способами. Образцы биологического материала окрашивают специальной сывороткой с антителами, после этого бактерии начинают подсвечиваться зеленым светом в ультрафиолетовых лучах. Результаты исследования оцениваются по 4х бальной шкале (1 плюс — свечение бактерии еле выраженное, почти незаметное, 2 плюса — по периферии бактерии наблюдается слабое свечение, 3-4 плюса — бактерия ярко светится зеленым по периферии).
2. РНГА (реакция непрямой гемагглютинации)  — данный метод серологической диагностики используется для выявления инфекций, вызванных бактериями или простейшими. Результаты оцениваются по интенсивности осадка красных кровяных телец: 1 плюс — слабой интенсивности, 2 — средней, 3-выраженной интенсивности, 4 плюса — резко интенсивная реакция. Положительным результатом считают показатели 3 или 4 плюса;
3. ИФА (иммуноферментный анализ) — наиболее точный и высокочувствительный метод серодиагностики. При помощи этого способа можно не только выявить возбудителя инфекции, но и отслеживать динамику развития заболевания по росту уровня антител. При помощи ИФА выявляют заболевания, передающиеся половым путем, в том числе и инфекции с латентным течением, ТОРЧ-инфекции, вирусные гепатиты.

Обратившись в наш медцентр, Вы можете быть уверены в полной конфиденциальности информации — результаты анализов с расшифровкой врач отдаст пациенту лично в руки!

Особенности исследований

При исследовании на бруцеллез проводится контроль сыворотки крови на самозадержку без антигена. Это позволяет повысить достоверность теста. Результат анализа на бруцеллез может быть положительным, отрицательным или невыраженным, то есть вызывающим сомнения. При получении сомнительных результатов, рекомендуется повторный забор крови. Также бруцеллез диагностируется по результатам посева крови, исследования костного мозга и спинно-мозговой жидкости.

Достоинства и недостатки серологии

Диагностика с применением серологических методов широко используется в современной медицине. Особенно актуален этот тест при выявлении вирусных и инфекционных заболеваний. Этот же тип анализов используется при географических скринингах и медицинских обследованиях для предотвращения эпидемиологических вспышек.

Серологические анализы имеют ряд преимуществ.

• Серологический тест любого типа имеет высокую достоверность.
• Анализы на серологию проводятся достаточно быстро. Результат РСК известен уже через сутки, а получить его можно посредством интернета, не выходя из дома. В особых случаях при стационарном лечении тест проводится в течение нескольких часов.
• РСК позволяет контролировать развитие болезни, и отслеживать эффективность проводимого лечения.
• Серологические методы исследования отличаются невысокой стоимостью и доступны пациентам.

Серологические анализы имеют и некоторые недостатки. Для того, чтобы обследование дало максимально достоверную информацию анализ крови следует проводить с учетом времени инкубационного периода болезни.

На достоверность исследования может повлиять человеческий фактор. Если пациент пренебрегает правилами подготовки к исследованию или лаборант допустил ошибку в обработке образца крови, возможно получение ложного или сомнительного результата. Такая ситуация возникает приблизительно в 5% случаев. Как правило, лечащий врач на основании клинических показаний легко вычисляет ошибку РСК.

Серологическое исследование крови современный и надежный способ выявления таких опасных заболеваний как ВИЧ, гепатит, бруцеллез, ЗППП и пр. Этот раздел медицины направлен на изучение плазмы крови человека и ее иммунологических свойств. Серологический метод широко распространен, а стоимость исследований в частных лабораториях сравнительно невысока. Для проведения анализа используется современное оборудование, которое сводит к минимуму влияние человеческого фактора на результаты исследований.

Особенности проведения серологического анализа крови

Серологический анализ крови проводится для того, чтобы узнать, болеет ли человек определенными инфекционными заболеваниями или он абсолютно здоров. Серологическое исследование делают в лаборатории, после выдается расшифровка. Изучение позволяет выяснить, насколько далеко зашла болезнь, определить стадию заболевания. Определение процедуры и подробное описание этапов анализа освещает википедия.

Анализ крови на антитела показан при большом количестве заболеваний. Речь идет о редких и широко распространенных недугах. Известно, что антитела и антигены способны взаимодействовать. Именно эту особенность врачи и используют, проводя исследование.

Если человек болеет, происходит образование иммунных защитных комплексов. Врач, проводя исследование, добавляет антиген или антитело, а потом наблюдает за реакцией. Именно так становится понятно, какая инфекция присутствует в организме. После этого можно смело начинать лечение.

Серологический анализ крови выполняется следующим образом. Врач берет антиген возбудителя заболевания, добавляет его в сыворотку. В результате манипуляций начинается химическая реакция. Врач производит оценку и выдает результат.

Часто возникает ситуация, при которой события развиваются противоположным образом. Речь идет о том, чтобы определить, какое заболевание у человека. Сделать это можно по имеющимся антигенам. Чтобы их выявить, врач берет антитела и добавляет их в кровь.

Если необходимо узнать, какая группа крови у человека, также сдают материал

Врачи обращают пристальное внимание на то, какова свертываемость крови. Возможно, при исследовании будет выявлено отклонение от нормы, тогда, если не начать лечение, последствия могут быть плачевными. Речь идет не только о тромбозе, у человека возможен инфаркт

Кроме того, повышается вероятность инсульта

Речь идет не только о тромбозе, у человека возможен инфаркт. Кроме того, повышается вероятность инсульта.

Как подготовиться к анализу?

Если вы желаете пройти исследование, то помните о том, что это надо сделать натощак. Анализ крови берут в лабораториях. То, как протекает реакция, врач определяет, используя сыворотку крови. Именно по ней можно понять, как взаимодействуют антигены и антитела. Полученная информация позволяет представить полную картину. Врач, опираясь на результат исследования, назначит наиболее эффективное лечение. Поэтому, если есть возможность, обязательно сдайте материал.

Соблюдайте диету хотя бы в день, предшествующий дню сдачи материала. Не ешьте жирного, сладкое также стоит исключить. Не съедайте слишком много пищи за раз. Алкоголь полностью исключите. Кроме того, не стоит изнурять себя физическими нагрузками. Поскольку стресс может стать причиной искажения результатов, избегайте его перед тем, как сдавать анализ крови.

Какие заболевания определяет анализ?

Если вы думаете, что у вас лямблии, амебиаз, то смело обращайтесь в лабораторию. Исследование материала покажет, если человек болен токсоплазмозом, описторхозом и рядом других заболеваний. Антитела станут сигналом к тому, что стоит начать лечение.

Данное обследование назначают для беременных, при подозрении на сердечно-сосудистую патологию. Варикозное расширение вен, аутоиммунные заболевания — все это показания для проведения исследования.

Кроме того, исследование делают:

• после лечения;
• до и после операции;
• для оценки эффективности лечения.

В урологии и венерологии исследование делают чаще всего.

Что называют нормой?

Если по результатам видно, что антител нет, то это очень хорошо. Инфекция отсутствует. Но такое случается редко, особенно если раньше были все симптомы, указывающие на наличие заболевания. Как правило, серологический анализ часто становится последним подтверждением диагноза.

Обычно анализ крови на антитела делают два раза. Сначала просто определяют, есть ли инфекция. Второй раз анализ на антитела сдают для того, чтобы понять, насколько динамично идет процесс. Если количество связей между антителами и антигенами увеличилось, то идет заражение. Для того чтобы правильно выбрать лечение, врач должен получить больше информации. В такой ситуации проводятся дополнительные химические реакции. Так можно понять, с какой болезнью придется бороться. Кроме того, так определяется стадия болезни.

Результат исследования крови на антитела может быть только повышенным. Нормой является значение на отметке «ноль». Именно по этой причине результат не может быть пониженным.