Полимеразная цепная реакция (пцр) диагностика: что это такое

Виды анализов на ЗППП

При проведении лабораторных исследований устанавливается точный диагноз и назначается терапия, направленная именно на устранение выявленных возбудителей.

Наиболее эффективными методами считаются:

• анализ крови;
• анализ мочи;
• соскоб из уретры и цервикального канала;
• исследование спермы;
• анализ секрета простаты.

Анализ крови

Анализ крови на ИППП выполняется методом прямой и непрямой иммунной флюоресценции. Материал окрашивают особыми антителами в сочетании с красителями.

Например, достоверность подобного исследования достигает при выявлении:

• сифилиса — 100%;
• микоплазмоза – до 70%;
• хламидиоза – 98%.

Можно выделить следующие исследования:

• анализ крови на TORCH инфекции: токсоплазмоз, краснуха и цитомегаловирус;
• RW – реакция Вассермана (применяется для выявления сифилиса);
• ВИЧ-инфекции, гепатиты B и C.

Анализ мочи

С помощью общего анализа мочи диагностируется воспалительный процесс в мочеполовой системе, а также наличие инфекции.

Для ПЦР мочу сдают в основном мужчины. Единственным и главным недостатком такого метода обследования является то, что можно установить лишь сам факт наличия бактерий, но невозможно определить их количество.

Соскоб из уретры и цервикального канала

Эта диагностика является наиболее эффективной для определения ИППП. Методика совершенно безопасная и безболезненная. Мазок позволяет обнаружить как наличие вредных микроорганизмов, так и их количество.

Забор проводится следующим способом: врач соскабливает материал из уретры и цервикального канала (только у женщин) с помощью специальных инструментов.

Сперма и секрет простаты

Метод диагностики предназначен для обнаружения в биоматериале:

• специфических фрагментов ДНК основных возбудителей инфекций, которые могут передаваться половым путём;
• урогенитальных инфекций мочеполовой системы у мужчин (к ним относятся: гонорея, хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз).

Главным преимуществом диагностики является установление не только наличия возбудителей, но и определение точного их количества.

Семенную жидкость пациент собирает самостоятельно в контейнер. Секрет простаты собирает врач после массажа предстательной железы.

Какие инфекции включены в перечень скрытых

В перечень инфекций, входящих в группу скрытых и выявляемых при лабораторных исследованиях, включены такие заболевания:

1. Герпес. Им заражена большая часть населения планеты, но проявления есть далеко не у всех. Герпес бывает нескольких типов, но у людей встречается два: первый или простой, поражающий губы, и второй, вызывающий генитальные симптомы, то есть поражающий половые органы. Распространённые пути передачи – контактный и бытовой. Характерные проявления: герпетические высыпания в виде переходящих в язвочки пузырьков, недомогание, увеличение регионарных (паховых или шейных) лимфатических узлов, зуд.
2. Цитомегаловирус (ЦМВ) тоже относится к категории герпесвирусов и передаётся воздушно-капельным и половым путями, от матери к ребёнку при родах и при лактации, при переливаниях крови. Имеется несколько форм: при наиболее лёгкой проявляется симптоматика ОРВИ, при тяжёлых поражаются внутренние органы, развиваются их воспаления.
3. ВПЧ расшифровывается как вирус папилломы человека, становится причиной образования папиллом и кондилом на теле, а у женщин способен поражать шейку матки и вызывать её рак. Основной путь передачи – половой, но возможно заразиться и при тесных контактах. При рецидивах увеличиваются количества и размеры новообразований (родинок и бородавок).
4. Кандидоз, называемый в народе молочницей, вызывается грибками рода Кандида, обитающими в женском влагалище и активизирующимися при изменении флоры или уровня кислотности. Вагинальный кандидоз при обострениях вызывает зуд половых органов, а также имеющие творожистую консистенцию и кисловатый запах влагалищные выделения. Так как микроорганизмы присутствуют в естественной флоре влагалища и являются условно-патогенными, молочница есть у 95% женщин, но некоторые страдают от частых рецидивов.
5. Гарднереллез вызывается условно-патогенными гарднереллами и относится к категории бактериальных вагинозов. При этой латентной инфекции, которая может обостриться из-за сниженного иммунитета или нарушенной влагалищной флоры, меняются объёмы и характер влагалищных выделений: они становятся обильными, обретают неприятный напоминающий гниющую рыбу запах.
6. Хламидиоз. Возбудителями такой инфекции являются хламидии, относящиеся к группе внутриклеточных паразитов. Проникают такие возбудители половым путём, обосновываются и размножаются в репродуктивной системе, поражая половые органы и вызывая дискомфорт, зуд или жжение во влагалище, изменения характера вагинальных выделений.
7. Уреаплазмоз провоцируется проникновением в женский организм уреаплазм, поражающих мочевыделительную и половую системы. Болезнь сопровождается патологическими выделениями из влагалища, болями или жжением при опорожнениях мочевого пузыря, частыми мочеиспусканиями.
8. Микоплазмоз вызывается одноклеточными бактериями микоплазмами, проникающими в клетки тканей разных внутренних органов. При попадании в урогенитальный тракт эти микроорганизмы поражают влагалище, цервикальный канал, придатки, матку, уретру. Симптоматика размыта: иногда появляются выделения, зуд, дискомфорт, ноющие болезненные ощущения в нижней части живота, учащение мочеиспускания.

Где сдать мазок на ЗППП

Сдать мазок на ЗППП вы можете в нашей клинике.

Наши преимущества:

• мазок будет брать врач, а не медсестра
• процедура пройдет безболезненно благодаря местной анестезии
• мы работаем с лучшими лабораториями Москвы, что обеспечивает широкий спектр исследований и точность результатов

После получения ваших анализов врач проведет расшифровку и проконсультирует вас. При необходимости будет назначено лечение. Оно позволит быстро избавиться от ЗППП и вернуться к полноценной половой жизни.

Если вам нужно сдать мазок на ЗППП, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Мазок на ЗППП методом ПЦР

ПЦР – основной метод диагностики ЗППП.

Всего за несколько часов этот метод позволяет обнаружить генетический материал патогена в биоматериале пациента. Выявляется РНК или ДНК.

Метод имеет высокую достоверность. Он очень редко дает ложные результаты при условии правильного забора, хранения и транспортировки клинического материала. ПЦР бывает количественная и качественная.

Расшифровка мазка на ЗППП, если применяется качественный метод, не составляет труда. Результат может быть положительный или отрицательный. Если микроорганизм выявлен, пишут «обнаружено». Если нет, то «не обнаружено».

ПЦР выявляет патогенные бактерии или вирусы даже при наличии всего 100 копий ДНК в образце. Но иногда сам факт выявления микроорганизма не говорит о болезни. Чтобы определиться с диагнозом, необходимо знать количественные показатели. В таком случае проводится количественная ПЦР. Она определяет количество копий ДНК в пробе. Это необходимо при диагностике уреаплазмоза, микоплазмоза, кандидоза.

Перечисленные микроорганизмы могут присутствовать в урогенитальном тракте в небольших количествах. И только при значительном увеличении популяции способны вызывать воспалительные процессы. Результаты таких мазков выдаются в копиях ДНК на мл. Обычно пороговым значением считается 10 в 4 степени. При таком результате врач полагает, что пациенту требуется лечение для эрадикации возбудителей ЗППП или уменьшения их количества.

Анализ методом ПЦР

ПЦР анализ — что это такое? Это метод использует принципы молекулярной биологии. Для исследования материала применяются особые ферменты, которые многократно и быстро копируют ДНК, РНК фрагменты возбудителей болезни. Существует разные виды ПЦР анализа в зависимости от исследуемого материала (кровь, моча, кал и т.д.). После обработки сотрудники лаборатории сравнивают с базой данных полученный результат, выявляют концентрацию, тип возбудителя.

Анализ на ПЦР помещают в специальный амплификатор (прибор), который нагревает и охлаждает пробирки с биоматериалом. Изменения температуры нужны для репликации фрагментов. Точность результата будет зависеть от точности температурного режима. Метод полимеразной цепной реакции помогает выявить:

• инфекционный мононуклеоз;
• ВИЧ;
• цитомегаловирусную инфекцию;
• вирусные гепатиты G, C, B, A;
• инфекции/заболевания, передающиеся половым путем (ИППП/ЗППП): гарднереллез, трихомониаз, уреаплазмоз;
• герпетическую инфекцию;
• онкогенные вирусы;
• листериоз;
• хеликобактерную инфекцию;
• клещевой энцефалит, боррелиоз;
• туберкулез;
• кандидоз.

Крови

На данный момент из-за новизны технологии анализ крови методом ПЦР все еще имеет высокую цену. Для подготовки биоматериала не нужно соблюдать определенные требования. Даже вызванные физическими нагрузками, стрессами, сменой рациона питания изменения состава не влияют на результат исследования. ПЦР анализ крови может испортить только прием антибактериальных средств, поэтому перед сдачей необходимо выдержать паузу между лечением и тестом.

ПЦР исследование крови – самый распространенный вариант диагностики хронических, острых инфекционных патологий при вирусном или атипичном проявлении. Серологические методы исследования имеют определенную трудность при проведении – определение наличия возбудителя проводится по наличию антител в организме человека. Результат мог быть ложноотрицательным, если состояние больного не давало время для их выработки.

Мазка

В сфере гинекологии для исследования наличия инфекционных микроорганизмов используют ПЦР анализ мазка. Работа с материалом проводится по тому же принципу, что и с кровью: многократное увеличение фрагментов ДНК возбудителя, чтобы с легкостью его идентифицировать. Это же помогает обнаружить скрытые инфекции у женщины. Для проведения анализа могут быть взяты разные биологические жидкости: слюна, мокрота, моча, кровь. В гинекологии для точности определения чаще используется мазок со слизистой влагалища из цервикального канала.

Для проведения ПЦР существуют определенные показания. Нередко его нужно сделать, чтобы выявить устойчивый к антибиотикам вид возбудителя. У женщин основными показаниями для диагностики по этому методу выступают:

• беременность, которая протекает тяжело;
• острая фаза ИППП;
• если есть подозрение на переход ИППП в хроническую стадию;
• поиск причин бесплодия.

Кала­

Для выявления инфекции может быть назначен со стороны врача анализ кала на ПЦР. Для того, чтобы получить максимально достоверные результаты после теста, необходимо придерживаться следующих правил перед забором биоматериала:

• за несколько суток прекратить прием слабительных препаратов: масла, свечи;
• исключить медикаменты, которые дают специфическую окраску калу, к примеру, с содержанием железа.

Для забора следует использовать стерильную палочку и контейнер. Чем-либо их дополнительно протирать, ополаскивать не нужно. При сборе материала будьте осторожны, вы не должны задеть рукой внутренние стенки контейнера. Следите, чтобы в кале не было примесей мочи, нельзя использовать дополнительные вспомогательные средства для испражнения (клизма). Собирать материал нужно в день сдачи, хватит 1/3 объема контейнера. Данный метод диагностики имеет следующие преимущества:

1. Анализ способен указывать на ДНК паразита, другие же тесты могут определять только остатки их жизнедеятельности.
2. Высокая точность, будет установлен возбудитель.
3. Ультрачувствительный анализ, который способен выявить даже одну клетку вируса.
4. Результат исследования ПЦР будет готов через 4-5 часов.

Мочи

При необходимости для проведения теста врач может взять для исследования мочу. Высокая точность открывает возможность работать с любой биологической жидкостью, из которой удается извлечь ДНК вируса. Чтобы сдать анализ мочи ПЦР, нужно придерживаться таких ограничений перед забором материала:

• минимум за 1 день до процедуры прекратить половые контакты;
• за 3 недели до сдачи должно быть окончено любое антибактериальное лечение, потому что медикаменты смажут картину;
• сдавать анализ нужно натощак (жидкость тоже запрещена);
• брать нужно первую утреннюю порцию материала.

Разновидности ПЦР

Метод исследования применяется для различных целей, поэтому ПЦР-методика имеет разновидности:

1. С обратной транскрипцией – применяется для многократного удвоения и последующего определения того, РНК какого микроорганизма получилось выделить. Для этого используют библиотеку данных о структурах различных возбудителей.
2. Инвертированная – используется, когда имеется маленький участок внутри конкретной последовательности.
3. Вложенная – применяют для уменьшения количества нежелательных продуктов реакции. Для этих целей проводят два последовательных исследования.
4. Асимметричная – применяют в случае, если нужно умножить в большей степени одну из всех имеющихся цепочек ДНК.
5. Количественная (в реальном времени) – необходима для непосредственного изучения того, как меняется количество получаемого продукта в каждом новом цикле реакции ПЦР.
6. Цифровая – наиболее современная и точная.
7. Групп-специфическая – это такое исследование, которое проводится в целях изучения родственных связей.
8. Ступенчатая – снижает влияние неспецифического взаимодействия праймеров.

Если мазки хорошие, могут ли быть ЗППП?

У разных тестов разная чувствительность.

Это показатель, отражающий вероятность получения положительного результата теста при реально существующей инфекции.

Например, чувствительность 90% означает, что из 10 человек с гонореей 9 получат этот диагноз, а ещё один увидит хорошие результаты мазков, несмотря на имеющуюся у него болезнь.

В нашей клинике для выявления инфекций используются самые чувствительные тесты, которые дают правильные результаты в 100% случаев.

Наименьшей чувствительностью обладает мазок на флору.

Врачи знают о том, что он может не показывать существующие у пациента инфекции.

Поэтому его результаты трактуются следующим образом:

• если возбудитель выявлен, ставится диагноз;
• если возбудитель не выявлен, диагноз не исключается, а проводится дополнительное обследование пациента другими методами.

В некоторых ситуациях недостаточной чувствительностью обладает бак посев.

В частности, он не всегда способен обнаружить хроническую хламидийную инфекцию.

Для подтверждения ЗППП мы используем в основном ПЦР.

Эта методика обладает самой высокой чувствительностью среди всех существующих способов диагностики венерических заболеваний.

Положительный анализ ПЦР – что это значит?

В большинстве случаев интерпретация ПЦР не представляет затруднений.

Особенно если выдаются качественные результаты ПЦР диагностики.

Но всё же некоторые пациенты путаются в понятиях.

Когда врач им говорит, что результат исследования ПЦР положительный, они воспринимают эту новость с радостью.

Потому что слово «положительный» ассоциируется с чем-то хорошим, благоприятным.

Но на самом деле всё обстоит совсем наоборот.

Позитивность означает присутствие в организме определенного возбудителя.

Поэтому после положительный результат означает, что вам будет назначено лечение.

Если же он отрицательный, это действительно повод для того, чтобы обрадоваться.

Потому что такой результат значит, что инфекции, на которую проводилось исследование, у вас нет.

На какие инфекции берут мазок на ПЦР?

Наиболее информативным является мазок ПЦР при исследовании на:

• гонорею
• трихомониаз
• хламидиоз
• герпес
• микоплазмы
• уреаплазмы
• гарднереллы
• папилломавирус

Чаще всего проводят обследование на все инфекции сразу.

В том числе в ситуации, когда:

• у человека уже выявлен в урогенитальном тракте возбудитель (например, в ходе микроскопического исследования мазка определен гонококк);
• известен диагноз у источника инфекции.

Наличие одного возбудителя не исключает присутствие в урогенитальном тракте другого.

У многих пациентов выявляют 2 и более инфекции сразу.

Недообследованность – одна из наиболее частых причин неудач в лечении, когда после этиологического, лабораторно подтвержденного выздоровления не наступает выздоровление клиническое.

Симптомы сохраняются, потому что у человека не выявлен другой возбудитель ЗППП.

В итоге диагностику и лечение нужно проходить заново.

Чтобы этого не случилось, лучше сразу обследоваться на все ЗППП.

Преимущества анализа

Гестационный период может быть осложнен внутриутробной инфекцией, выявить и устранить которую бывает непросто. Коварство ВУИ заключается в отрицательном влиянии на состояние здоровья развивающегося плода.

Инфекции становятся причиной инфицирования ребенка, ухудшают его развитие. Часто становятся причиной внутриутробных аномалий несовместимых с жизнью.

Гинекологи рекомендуют внимательно относится к своему здоровью и проходить все рекомендованные процедуры.

Анализ на выявление инфекций с помощью ПЦР метода зарекомендовал себя только с положительной стороны:

• во-первых, полученные результаты действительны на 100 %;
• во-вторых, инфекция идентифицирована качественно и количественно;
• в-третьих, четко определяется степень формации и серьезность патологии.

Метод точен и эффективен. Из минусов – высокая стоимость.

Не все виды анализов на инфекции включены в перечень ОМС, поэтому возникает необходимость обращаться в частные организации.

Например, вирус Эпштейна-Барра можно выявить только при помощи цепной ступенчатой реакции. Его стоимость в частных лабораториях будет колебать от 900 до 1300 рублей.

Немаловажным преимуществом является быстрота исследования. Результаты получают  в день сдачи биологического материала, либо на следующий день.

Своевременное выявление возбудителя максимально снижает риск заражения плода во внутриутробном периоде. Кроме того, гинекологи продумывают лечение по результатам ПЦР диагностики.

Диагностика методом ПЦР – выявление и диагностирование

Метод ПЦР – это такое исследование, которое выявляет фактически весь спектр возбудителей вирусного и бактериального характера. Полимеразная реакция, как диагностика заболеваний у мужчин, женщин и детей, показывает результаты исследований в различных областях медицины: гинекологии, урологии, терапии и так далее.

В частности, при сдаче крови идентифицируют такие заболевания:

• гепатиты вирусного характера: А, В, С и D, ТТ – сдается кровь;
• цитомегаловирус;
• ВИЧ;
• вирусы герпеса (обнаруживаются не только у мужчин и женщин, но и у детей соскоб показывает результат);
• опоясывающий лишай;
• инфекция энтеровирусная;
• токсоплазмоз;
• краснуху;
• коклюш;
• листериоз (сдается соскоб тканей лимфоузлов, кровь, околоплодные воды и т.д.) и прочее.

Стоит отметить, что цитомегаловирус является бессимптомным заболеванием. То есть человек со здоровой иммунной системой может носить в организме цитомегаловирус без знания проблемы заболевания. Цитомегаловирус наделен 60-тидневным инкубационным периодом. Запущенная форма болезни опасна для мужчин, при беременности, и порождает, как цепная реакция, энцефалит, пневмонию и прочие заболевания.

Методика ПЦР выявляет коклюш – острое инфекционное заболевание дыхательных путей (верхних), опасное так же при беременности, для детей и мужчин. Коклюш передается воздушно-капельным путем. Фактически 90% людей при контакте с больным, должны сдать анализ на коклюш, поскольку инфекция отличается повышенной контагиозностью.

При беременности коклюш может вызвать асфиксию плода. У мужчин, детей, женщин при беременности коклюш в запущенном виде поражает, как цепная реакция, сердечно сосудистую систему, легкие, бронхи. Чтобы обнаружить коклюш для исследования у мужчин, женщин и деток, берется соскоб либо мазок полости рта, кровь из вены/пальца, мокрота и моча.

Кроме крови ПЦР исследует иного рода биоматериалы: фрагменты мочи, соскоб, мазки, слюну у мужчин, детей, женщин и обязательно при беременности околоплодные воды по назначению врача, ведь стоимость исследования не мала. Частные лаборатории устанавливают собственную стоимость на производимые анализы.

Диагностика типового плана крайне важна, поэтому стоимость играет меньшую роль в определении заболевания. При получении ложноотрицательных результатов с лаборатории расшифровка их уже не важна, а болезнь может быть не идентифицирована и запущена цепная реакция инфецирования всего организма.

Что это?

Скрытые инфекции вызываются либо патогенными, либо условно-патогенными микроорганизмами. Первые проникают в организм разными путями (как правило, половым) и начинают размножаться, вызывая характерные симптомы. Условно-патогенные возбудители всегда присутствуют в тканях человека, но начинают проявлять активность при определённых условиях, к примеру, при сниженном иммунитете.

Скрытые половые инфекции. Видео от известного доктора!

Почему инфекции именуются скрытыми? Потому что они способны долгое время присутствовать в организме и не давать знать о себе, а потом вызывать характерные симптомы. Период носительства, длящийся от заражения до первых проявлений, бывает продолжительным, достигающим нескольких месяцев или лет.

Взятие гинекологического мазка

Гинекологический мазок берут для оценки состояния половых путей женщины. Анализ клеток из влагалища и цервикального канала помогает выявить хронические воспаления, половые инфекции, обнаружить развитие женской онкологии на ранних стадиях.

В профилактических целях мазки берут ежегодно у всех женщин репродуктивного возраста. Внеочередной забор материала может понадобиться при:

• подготовке к беременности или процедуре ЭКО;
• появлении тревожных симптомов – зуд, жжение, высыпания, бородавки в интимной зоне, нарушение менструального цикла;
• после полового контакта с новым партнером (без барьерной контрацепции);
• при частых абортах и неоднократных выкидышах;
• после длительной терапии гормонами или антибиотиками.

Нерегулярный цикл

Случайные связи

Терапия гормонами

Женщинам с отягощенной наследственностью мазок из шейки матки и влагалища рекомендуют сдавать 2 раза в год. Взятие мазка из половых путей женщин проводит гинеколог во время осмотра пациентки на кресле. Врач собирает биоматериал из влагалища, наружного зева матки и канала шейки матки.

Гинекологический мазок на флору

Материал помогает оценить степень микробной чистоты влагалища. Взятие мазков на флору – безболезненная процедура. Однако результаты этого анализа дают врачу важную информацию о состоянии естественной микрофлоры и заражении патогенными микроорганизмами.

Исследование позволяет диагностировать такие патологии:

• вагинит;
• гонорея;
• кандидоз;
• трихомониаз;
• цервицит и другие болезни, вызванные патогенной флорой.

Для анализа состава микрофлоры применяют метод микроскопии с окрашиванием по Граму. Методика основана на способности бактериальной клетки по-разному реагировать на контакт с анилиновыми красителями:

• Грамположительные бактерии – окрашиваются в синий (фиолетовый) цвет. Эти микроорганизмы отличаются простым строением, а их клеточная оболочка очень чувствительная к воздействию антибактериальных препаратов.  
• Грамотрицательные бактерии – при воздействии красителя обесцвечиваются. Их клеточная стенка имеет сложное строение. Это позволяет им сохранять устойчивость к большинству антибиотиков. Именно грамотрицательные бактерии чаще всего вызывают патологии женской половой системы.   

После окрашивания по Граму и исследования материала под микроскопом, используют метод бактериологического посева клеток на питательную среду. Оказавшись в благоприятных условиях микроорганизмы начинают активно расти, образуя колонии. Эти колонии идентифицируют, после чего испытывают на чувствительность к антибиотикам

Это важно для назначения эффективного лечения

Взятие мазка на чистоту влагалища точно определяет возбудителя болезни и оценивает его чувствительность к антибактериальным препаратам разных групп.

Мазок на скрытые инфекции

Ряд заболеваний половой системы протекают без симптомов и могут никак не проявлять себя на протяжении многих лет. При этом они нарушают половую и репродуктивную функцию, вызывают бесплодие, нарушают развитие плода во время беременности.

К скрытым инфекциям относят:

• гонорею;
• сифилис;
• генитальный герпес;
• вирус папилломы человека;
• уреаплазмоз;
• хламидиоз.

После взятия мазка на скрытые инфекции, материал направляют в лабораторию для проведения ПЦР-диагностики. Техника позволяет точно определить специфические ДНК молекулы патогенных микроорганизмов. Методика очень точная и чувствительная. Даже одна микробная клетка в образце может быть выявлена во время анализа.  

Взятие мазка на онкоцитологию

Это анализ клеточной структуры тканей половых органов. Взятие мазка из цервикального канала проводят при подозрении на дисплазию эпителия и онкологию. Это наиболее эффективный способ ранней диагностики злокачественных опухолей. Забор мазка из цервикального канала также информативен при хроническом воспалении и половых инфекциях.

В лаборатории мазок на онкоцитологию окрашивают и исследуют под мощным микроскопом для выявления аномалий и дефектов строения клеток. По результатам взятия мазков на цитологическое исследование пациентка получает один из пяти типов цитограмм:

• 1 класс – атипичные клетки отсутствуют (норма);
• 2 класс – выявлены воспалительные изменения структуры клеток;
• 3 класс – имеются выраженные признаки дисплазии ткани;
• 4 класс – подозрения на рак и эрозию шейки матки;
• 5 класс – онкологический процесс.

Какие варианты проведения имеет метод ПЦР?

Наиболее популярными вариантами в лабораториях диагностических являются:

• с обратной транскрипцией ПЦР;
• с «горячим» стартом ПЦР – в реакционную среду вводятся блокирующие активность полимеразы антитела, что обеспечивает запуск реакции в строго определенный момент;
• с анализом результатов по «конечной точке» ПЦР ‑ итог оценивается по наличию флуоресценции в неоткрытом сосуде, что устраняет риск загрязнения реакционной среды (применяются ДНК-зонды с флуорофорной меткой);
• в режиме «реального времени» ПЦР (ПЦР-РВ, Real-Time PCR) –метод количественный, в котором участвуют красители флуоресцентные, способные встраиваться внутрь спирали ДНК, увеличивая интенсивность свечения, и после каждого цикла копирования по интенсивности флуоресценции определяют количество воспроизведенных молекул;
• мультиплексная (мультипраймерная) ПЦР – в одном сосуде амплифицируется две и больше ДНК-последовательности, что позволяет определять несколько патогенов одновременно.

Для различных исследовательских целей применяются следующие варианты метода ПЦР:

• гнездовая («вложенная») – с двумя праймерными парами, где вторая пара воспроизводит участок ДНК молекулы, полученной в первой реакции, тем самым уменьшая число нежелательных реакций;
• «инвертированная» ‑ реализуется, когда известен только маленький фрагмент внутри искомой последовательности (ДНК разрезается ферментами рестриктазами, а затем закольцовывается так, чтобы известные кусочки оказались на конечных участках исследуемого фрагмента);
• асимметричная – применяется, если надо воспроизвести исключительно одну цепочку молекулы, поэтому один праймер берется в значительном избытке;
• молекулярных колоний метод – используется акриламидный гель, который полимеризуется с реагентами ПЦР на поверхности и в итоге реакции формируются молекулярные колонии в определенных зонах полимера;
• длинных фрагментов – проводится амплификация участков из 10 тысяч и более нуклеотидов;
• ступенчатая – начальные циклы проводятся в высокотемпературных условиях для повышения специфичности сцепления праймеров, а после накопления молекул температура снижается;
• случайных полиморфных фрагментов (RAPD) – дает возможность дифференцировать микроорганизмы с похожими по структуре ДНК;
• иммуно-ПЦР – исследуются антигены, а не нуклеиновые кислоты, путем предварительного присоединения антител с ДНК-меткой и последующим воспроизведением;
• групп-специфическая;
• с быстрой амплификацией концов кДНК;
• виртуальная и др.

Выяснив, для чего проводится ПЦР анализ, что это такое (цена заметно различается для разных методов), пациент понимает, чего ему ожидать от исследования.